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聊一聊CAR-T的生產(chǎn)流程

發(fā)布時間: 2022-04-18  點擊次數(shù): 4512次
 CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝有哪些環(huán)節(jié)?


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1)分選和凍存:用細胞分選儀對單采產(chǎn)物APH進行T細胞分選純化,藥明巨諾的工藝能夠?qū)細胞的純度提高到99%,以保障后續(xù)工藝的穩(wěn)健性。純化的中間產(chǎn)物會經(jīng)過程序降溫儀降溫,儲存于氣相液氮罐,準備進入后續(xù)生產(chǎn)工藝。

2)激活:技術(shù)人員從液氮罐中取出中間產(chǎn)物后,加入激活磁珠,完成T細胞激活,并置于二氧化碳培養(yǎng)箱進行激活培養(yǎng)。

3)轉(zhuǎn)導:激活后的T細胞完成慢病毒載體的CAR轉(zhuǎn)導。慢病毒可以轉(zhuǎn)導分裂期及非分裂期細胞,轉(zhuǎn)導效率高。其次從整合偏好性角度,慢病毒偏好整合非編碼區(qū),相對安全。

4)擴增:轉(zhuǎn)導后的T細胞接種于生物反應(yīng)器進行擴增工序,生物反應(yīng)器采用封閉式自動化的動態(tài)擴增體系,以實現(xiàn)密閉生產(chǎn)環(huán)境及動態(tài)過程監(jiān)控,灌流模式培養(yǎng)也比較有利于細胞增殖。整個擴增工序大概在5天左右。

5)收獲:擴增使CAR-T細胞達到收獲標準后進行收獲工序。收獲標準包括活細胞數(shù)、轉(zhuǎn)導效率、體外效價、T細胞純度。收獲工序包括清洗、去磁珠。

6)分裝:在生物安全柜內(nèi)完成,分裝的CAR-T產(chǎn)品被保存于氣相液氮罐中,放行質(zhì)檢合格后通知臨床做回輸準備。

推薦產(chǎn)品:

eBioscience  CD3功能性抗體     貨號16-0037-81

eBioscience  CD28功能性抗體   貨號16-0289-81


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